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Use of Fluorogenic Proteinase Assays to Examine Protein Mobilization in Barley Varieties and Across Populations

MBAA TQ vol. 44, no. 4, 2007, pp. 273-277  |  VIEW ARTICLE

Mark R. Schmitt and Allen D. Budde. USDA Agricultural Research Service, 502 Walnut St., Madison, WI 53726.

Abstract
Improved methods for efficient sample extraction and proteinase assay have simplified the estimation of malt proteinase activity, making feasible the examination of larger sample sets than was possible previously. The ability to characterize various proteinase activities across >10(^3) lines enables the use of comprehensive, structured populations of barley germplasm to better understand the interactions between proteinase activities, protein modification, and other contributors to desirable malt characteristics. Application of the assays to a snapshot of U.S. barley lines highlights differences between cysteine- and serine-class endoproteinase functions during barley germination and suggests previously unsuspected links between protein and carbohydrate catabolism in the germinating seed.

Keywords: balanced modification, germplasm development, malting quality, proteinase

 

Síntesis
Métodos mejorados para la eficaz extracción de muestras y el análisis de proteinasa han simplificado la estimación de la actividad de proteinasa en malta, posibilitando así la reexaminación de juegos mayores de muestras. La habilidad de caracterizar varias actividades de proteinasa a través de líneas >10(^3) hace factible el uso de poblaciones estructuradas comprehensivas de germplasma de cebada para así mejor entender las interacciones entre las actividades proteínicas, la modificación proteínica y otras cosas que contribuyen en formar las características deseables de la cebada malteada. La aplicación de los análisis a una muestra de líneas de cebada norteamericana destaca las diferencias entre las funciones de endoproteinasa clase cisteínica y clase serínica durante la germinación de cebada, lo que sugiere que existen lazos previamente desconocidos entre el catabolismo proteico y el de carbohidratos al germinar la semilla.

Palabras claves: calidad de malteo, desarrollo de “germplasma,” modificación balanceada, proteinasa

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